1. Tenká peptidoglykánová vrstva:Gramnegatívne baktérie, vrátane salmonel, majú v bunkových stenách relatívne tenkú vrstvu peptidoglykánu v porovnaní s gram-pozitívnymi baktériami. Peptidoglykán je polymér podobný oke, ktorý prispieva k pevnosti a tuhosti bunkovej steny.
2. Vonkajšia membrána:Gramnegatívne baktérie, vrátane salmonel, majú okrem cytoplazmatickej membrány vonkajšiu membránu. Vonkajšia membrána je jedinečná vlastnosť, ktorá odlišuje gramnegatívne baktérie od gram-pozitívnych baktérií.
3. Lipopolysacharid (LPS):Vonkajšia membrána salmonel obsahuje molekuly lipopolysacharidu (LPS). LPS je komplexná molekula pozostávajúca z lipidov a polysacharidov. Lipidová časť LPS, známa ako lipid A, je zodpovedná za endotoxické vlastnosti gramnegatívnych baktérií.
Farbenie gramu zahŕňa nasledujúce kroky:
1. Crystal Violet Farbining:Všetky baktérie sú zafarbené farbivom kryštálovej fialovej farby, ktoré vstupuje do gram-pozitívnych aj gramnegatívnych bakteriálnych buniek.
2. Gramov jódový roztok:Gramov jódový roztok sa pridáva ako mordant, ktorý pomáha stabilizovať komplex kryštálového fialového-jódu v bakteriálnych bunkách.
3. Krok odfarbenia:Zafarbené bunky sa potom ošetrí dekolorizačným činidlom alkohol-acetón. Gram-pozitívne baktérie si zachovávajú komplex kryštálovej fialovej-jód, zatiaľ čo gramnegatívne baktérie strácajú farbivo.
4. Safranin Continuin:Nakoniec sú dekolorizované gramnegatívne baktérie kontrastne farbené safranínom, ktorý im dodáva ružovú alebo červenú farbu.
Po dokončení týchto krokov sa grampozitívne baktérie objavujú fialové pod mikroskopom v dôsledku zadržanej kryštálovej fialovej, zatiaľ čo gramnegatívne baktérie, vrátane salmonel, sa objavujú ružové alebo červené v dôsledku kontrastu safranínu.
Celkovo je Salmonella gramnegatívna kvôli svojej tenkej peptidoglykánu, prítomnosti vonkajšej membrány s lipopolysacharidmi (LPS) a jej negatívnej reakcii na postup zafarbenia gramu, čo vedie k ružovej alebo červenej sfarbení.